En Japón, los métodos para el análisis de aflatoxinas en el maní, el maíz y otros productos alimenticios están prescriptos en “Métodos de testeo de aflatoxina B1 en cereales, frijoles, nueces y semillas, y condimentos” (Notificación Nº 0326001 del Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar, fechada el 26/03/2002).
Esta edición de Novedades de Aplicación introduce un ejemplo de análisis de aflatoxinas de alta velocidad, utilizando el sistema LC Prominence UFLC ultra-fast con la columna Shim-pack XR-ODS de alta velocidad y alta resolución.
Análisis de una solución estándar
Como las aflatoxinas B1 y G1 muestran una fluorescencia natural débil, este método emplea la reacción de ellas con ácido trifluoroacético (TFA) para convertirlas en las aflatoxinas hidróxi-derivadas B2a y G2a, respectivamente. Con esto se busca aumentar su intensidad de fluorescencia para el análisis. Las aflatoxinas B2 yG2 no reaccionan con el TFA.
La Figura 1 muestra los resultados de una solución estándar, mezcla de las aflatoxinas puras a una concentración unitaria de 10 µg/L, utilizando un volumen de inyección igual a 4 µL . Las condiciones analíticas de muestran en la Tabla 1.
Utilizando el Shim.pack XR-ODS (diámetro de partícula = 2.2 µm), el ciclo de análisis se completó en sólo 3 minutos.
La Figura 2 muestra las estructuras de las aflatoxinas y los derivados obtenidos luego de la reacción con TFA.
Linealidad
La Figura 3 muestra la linealidad de las curvas de calibración (volumen de inyección = 4 µL ) de la mezcla estándar de aflatoxinas. La concentración unitaria se varió entre 1 y 50 µg/L. Se obtuvo una excelente linealidad para cada compuesto, todas con un coeficiente de determinación (R2) mayor a 0.999.
Análisis de maíz
La Figura 4 muestra los resultados de una solución de extracto de maíz contaminada con aflatoxinas. La preparación de la muestra se llevó a cabo según el procedimiento estándar, consistente en una extracción en fase sólida seguida por la derivatización con TFA (para detalles, contacte a nuestra Gerencia de Capacitación y Aplicaciones ). En esta solución se detectaron aflatoxinas B1 y B2 en concentraciones de 15 µg/L y de 1 µg/L , respectivamente.