El muestreador automático Nexera ha sido diseñado para ofrecer a los usuarios herramientas de última generación para evitar la contaminación cruzada de las muestras (“carryover”). Ahora es posible enjuagar a fondo el camino de las muestras y la superficie de la aguja con diferentes solventes que eliminan los rastros de los compuestos más pegajosos. Además, cuenta con un diseño de aguja con una mínima área contacto, que por sí sola reduce significativamente la contaminación cruzada y asegura una gran reproducibilidad de los análisis de compuestos a nivel trazas.

Contaminación cruzada de cafeína

Sin aplicar el enjuague del puerto de inyección ni el enjuague interno o externo de la aguja, la cafeína inyectada en una concentración de 4 g/L produjo una contaminación cruzada de sólo 0,0004 % tras la inyección de un blanco (pos-blanco 1). Al inyectar un segundo blanco (pos-blanco 2), no se detectó presencia de cafeína.

Inyección	Contaminación cruzada
Cafeína	-
Pos-blanco 1	0,0004 %
Pos-blanco 2	No se detectó

Columna	ODS (2,0 mm D.I. x 100 mm, 1,8 µm)
Fase móvil	Metanol/Agua = 2/8
Caudal	0,4 mL/min
Temperatura de columna	40ºC
Detección	UV 272 nm
Presión	100 MPa
Volumen de inyección	5 µL

### Contaminación cruzada de clorhexidina

La clorhexidina es un compuesto básico muy utilizado para evaluar los niveles de contaminación cruzada, especialmente por su comportamiento altamente adsortivo con una gran variedad de materiales. En este experimento se colocaron 2 g/L de clorhexidina en agua dentro del muestreador automático con la primera inyección de muestra. Con el enjuague del puerto de inyección y de la superficie interna y externa de la aguja, se logró eliminar por completo la contaminación cruzada de clorhexidina por debajo del límite de detección del método.

Inyección	Contaminación cruzada
Clorhexidina (2 g/L)	-
Pos-blanco 1	No se detectó ( < 0,003 %)

Columna	ODS (2,0 mm D.I. x 100 mm, 1,8 µm)
Fase móvil	Metanol/Agua = 2/8
Caudal	0,4 mL/min
Temperatura de columna	30ºC
Detección	UV 272 nm
Presión	100 MPa
Volumen de inyección	5 µL
Solución para enjuague	0,05 % de ácido fórmico en metanol
Lavado de la aguja	Enjuague externo por bombeo Enjuague por inmersión Enjuague interno
Enjuague del puerto de inyección	Realizada

Contaminación cruzada con LCMS-2020

Para evaluar la contaminación cruzada en el muestreador automático Nexera SIL-30AC se utilizó un espectrómetro de masas LCMS-2020 de simple cuadrupolo. El siguiente cromatograma muestra la inyección de una mezcla de desipramina y amitriptilina a 5 mg/L cada una. En la tabla se compara la efectividad de los diferentes enjuagues y su efecto en la contaminación cruzada. Combinando el enjuague de la aguja por inmersión con el enjuague por bombeo se logró eliminar por completo la contaminación cruzada de estos compuestos más allá del límite de detección del método de espectrometría de masas.

Enjuagues	Carryover de desipramina	Carryover de amitriptilina
1. Enjuague por inmersión 2. Enjuague por bombeo 3. Enjuague interno 4. Enjuague del puerto	No se detectó ( < 0,0042 % ó 1,0 pg )	No se detectó ( < 0,0027 % ó 0,68 pg    )
1. Enjuague por inmersión Enjuague por bombeo Enjuague interno	No se detectó ( < 0,0042 % ó 1,0 pg )	No se detectó ( < 0,0027 % ó 0,68 pg    )
1. Enjuague por inmersión Enjuague por bombeo	No se detectó ( < 0,0042 % ó 1,0 pg )	No se detectó ( < 0,0027 % ó 0,68 pg    )
1. Enjuague por inmersión	0,0098 %	0,0078 %
Ninguno	0,052 %	0,050 %


Columna	ODS (2,1 mm D.I. x 100 mm, 1,8 µm)
Fase móvil	A: 0,1 % de ácido fórmico B: Acetonitrilo/Agua (25/75)
Gradiente	B 25 % " 50% (0,75 min) " 90 % (0,76 min) 25 % (3,01 min)
Caudal	1,5 mL/min
Temperatura de columna	40ºC
Volumen de inyección	5 µL
Detección	LCMS 2020-ESI (+)
Presión	95 MPa
Enjuague por inmersión	0,1 % de ácido fórmico en metanol
Enjuague por bombeo	0,1 % de ácido fórmico en acetonitrilo
Enjuague interno	0,1 % de ácido fórmico en metanol
Enjuague del puerto de inyección	0,1 % de ácido fórmico en metanol